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目标信息素的环化进行的非常顺利,不过徐云并没有因此而产生丝毫松懈。
这间生物医药实验室的使用时间是十四天,虽然明面上来说,课题组只要在这个时间内解决四代吡虫啉的合成就能算成功。
但先前提及过,徐云的终极目标远远不是一个四代这么简单。
这次实验由于需要用到大量设备的缘故,整个项目从立项开始便借用了田良伟辅项项目的名义。
一旦时限完结,届时哪怕是田良伟也很难再给徐云提供这么好的实验条件。
因此这可以说是徐云当前最好的机会,一旦将它错过,轻则拖后第五代吡虫啉的研发,重则可能影响到知识点和时空副本的开启。
所以在对目标信息素完成环化后,徐云等人丝毫没有懈怠,一边继续进行了12小时的搅拌反应。
并于次日凌晨在冰浴冷却下,用饱和NH4Cl水溶液进行了淬灭反应。
到了这一步,剩下的便是将信息素结合蛋白于吡虫啉进行合成的环节了,也是几位生物研究生的主方向。
这个环节通俗点来说就是无限次的碰运气,环化后的信息素结合蛋白好比是一个铁环,为了好理解就假设将它按时钟刻度分成十二格吧。
徐云等人要做的就是拿个小钢珠从上往下丢,由于他们对9到12点钟方向做过了环化处理,所以钢珠的落点必然是9-12之间。
但这个刻度远远不够精细,钢珠只有稳稳的落到46分这个数字上,徐云等人的合成才能算成功——请注意,这只是宏观角度上一个比较好理解的说法,实际上那个圆盘的刻度数字要比12大上无数倍,比如是......
“22440484对!”
实验室内,周佩瑶看着IlluminaHiSeq高通量二代测序平台测序出的数字,平稳的对徐云说道:
“学长,我们通过小分子荧光竞争性结合实验研究了两个OBP与目标信息素的结合能力,一共获得的碱基数据量约为6.6G,过滤掉原始数据后的读数为22440484。
目标信息素与美洲大蠊样本的基因组比对一致性为84.62%左右,德国小蠊则为83.68%,结合部读数的理论值为648!”
22440484比648,三万五千分之一的概率,这绝不是一件简单的事儿。
听到这个数字,徐云轻轻点了点头,转而看向裘生:
“老裘,看咱俩的了。”
裘生一拍他肩膀,笑道:
“没啥说的,肝呗,大不了把哥们的这一头秀发都牺牲在这儿嘛。”
说着他表情一肃,拿起一条类似超市小票的纸条看了几眼:
“19.10和19.36kDa,蛋白质电泳条带的位置与预测的分子量一致,小任,直接上荧光竞争结合试验吧。
争取三个小时内把3,11-二甲基正二十七烷-2-酮和目标信息素的结合能力测出来,这样咱们会轻松很多。”
一旁任永存扶了扶眼镜,熟练的将早就准备好的两个试剂结合到了一起。
徐云则站到了在保持通风的超净台内,加入定量好的目标信息素1μg、AnchoredOligo4μg、2×ESReactionMix10μl、gDNARemover1μl,最后加入RNase-freeWater至混合液体积为20μl。
随后他将20μl混合液轻弹试管混匀,递给周佩瑶:
“小周,设定42℃,在PCR仪器中孵化15分钟,然后85°加热5秒。
再把合成的cDNA模板定量,1.2%琼脂糖凝胶电泳检测合格后储存到零下二十度的环境里。”
周佩瑶接过试管,重重点头:
“您放心吧,学长!”
如果说昨天的环化实验是一篇克苏鲁狗粮文的话,那么今天的合成实验则无疑是个治愈的小故事。
沉睡中,它被唤醒了。
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